Producción de proteínas recombinantes, caracterización y uso en ensayos de flujo lateral en Fundación Leloir y Univ. de Bs As (UBA) - 10 al 14 de noviembre
Del 10 al 14 de noviembre participamos en el taller formativo de producción de proteínas recombinantes para la caracterización y posterior uso en ensayos de detección mediante flujo lateral. Investigadores y estudiantes de Colombia, Chile, Brasil, Perú y Argentina se formaron a través de charlas y actividades prácticas que acompañaron todo el proceso desde la obtención de proteínas puras hasta el uso de estas en ensayos de flujo lateral. Así fortaleciendo el intercambio de conocimientos y relaciones entre integrantes de la red Reclone Latam, mediante el financiamiento de CYTED.
En la primera fase, dirigida por Cecilia D?Alessio en la Universidad de Buenos Aires (UBA), realizamos la purificación del RBD de la proteína spike de COVID-19, previamente expresado en Pichia, deglicoslidada y glicosilada, caracterizando estas mediante SDS-PAGE, espectrofotometría UV, HPLC, cromatografía de exclusión de tamaño (SEC) y dicroismo circular, aprendiendo la relevancia de los ensayos, y en qué casos utilizarlos. Logrando obtener fracciones de RBD puras. Posteriormente aprendimos del desarrollo de ensayos de flujo lateral con Ana Peinetti y Diana Capdevila en el Instituto Leloir, donde, a partir de nuestra RBD purificada, realizamos un test de flujo lateral para detectar anticuerpos contra RBD, pasando por los pasos de formación de las nanopartículas de oro conjugadas, hasta el montaje del test y el análisis de resultados. También fuimos instruidos por Lindomar Pena y Paula Benitez en enfermedades infecciosas y un test LAMP de Dengue.
Este taller, además de formativo, destaca lo importante que es la colaboración, la cual permitió la obtención de una proteína de interés pura, hasta montar un ensayo de flujo lateral en tan solo una semana. Agradecemos al equipo organizador de Reclone en Buenos Aires, quienes dirigieron los talleres e hicieron posible esta instancia, a las y los charlistas invitados y finalmente a cada participante que enriqueció la experiencia desde sus respectivas áreas de trabajo. Esta actividad contó con el financiamiento de @programacyted.